Buyclindamycin.ru

Современные методы лечения

Изучение эффективности связывания обогащенной 2'-F-модифицированной РНК-библиотеки с поликлональными аутоантителами

Измерение констант диссоциации комплексов аутоантител с исходной и обогащенными 2'-F-модифицированными РНК-библиотеками было проведено в соответствии с протоколами (п. 2.3.9.). Первоначально нами было проведено “пробное” измерение Kd комплексов аутоантител с исходной 2'-F-модифицированной РНК-библиотекой согласно протоколу Исходя из полученных данных, была определена область концентраций аутоантител, в которой происходит диссоциация их комплекса с исходной 2'-F-модифицированный РНК-библиотекой, и проведено повторное измерение Kd данного комплекса. Аналогичным образом было проведено измерение Kd комплексов аутоантител с 2'-F-модифицированной РНК-библиотекой после 6-го и после 10-го раундов отбора. Данные, использованные для расчета Kd комплексов аутоантител и 2'-F-модифицированных РНК-библиотек (табл. 4), описывали приведенным ниже уравнением :

f = С·(Kd + + - ((Kd + + )2 - 4··)0.5)/(2·),

где - концентрация аутоантител; - концентрация 2'-F-модифицированной РНК-библиотеки; f - доля связавшихся олигонуклеотидов; Kd - константа диссоциации комплексов 2'-F-РНК с аутоантителами; С - константа эффективности связывания комплексов аутоантител и 2'-F-олигорибонуклеотидов с нитроцеллюлозными фильтрами.

Используя полученные данные, находили константу С. Отношение f/С давало fнорм - нормированное значение доли комплексов 2'-F-РНК с аутоантителами. Нормированные данные описывали тем же уравнением, принимая С равной 1, и находили Kd (табл. 5).

Таблица 4. Расчетные данные для измерения Kd комплексов аутоантител и 2'-F-модифицированных РНК-библиотек: 1) исходной; 2) после 6-го раунда отбора; 3) после 10-го раунда отбора.

) 2) 3)

, нМ

f, %

fнорм, %

 

12000.0

36.6

100.7

 

6000.0

40.6

93.8

 

3000.0

34.1

85.7

 

1000.0

31.2

77.6

 

330.0

28.2

48.6

 

110.0

17.7

31.1

 

37.0

11.3

30.4

 

4.1

11.0

22.1

 

, нМ

f, %

fнорм, %

 

1800

60.0

68.2

 

600

86.6

98.4

 

200

93

121.1

 

66

29.9

37.9

 

22

4.3

5.4

 

7.4

4.2

5.3

 

2.4

2.5

3.2

 

0.8

2.2

2.9

 

0.3

2.1

2.7

 

, нМ

f, %

fнорм, %

600

86,3

87,7

200

110,0

111,7

66

85,9

87,2

22

69,4

70,5

7,4

30,9

31,4

2,4

25,6

26,0

0,8

17,8

18,1

0,3

3,5

3,6

Перейти на страницу: 1 2